在用尼康顯微鏡觀察標(biāo)本之前，必須首先對(duì)顯徽鏡進(jìn)行一些調(diào)節(jié)和預(yù)備操作，這些調(diào)節(jié)主要包括照明器、鏡筒、視場(chǎng)光闌和集光器的調(diào)節(jié)。
奧林巴斯顯微鏡

    照明器的調(diào)節(jié)。首先接通電源，打開(kāi)調(diào)壓變壓器使工作電壓在燈泡所標(biāo)電壓的范圍之內(nèi)，然后根據(jù)所用顯微鏡燈的類(lèi)型調(diào)中。調(diào)節(jié)的方法是把一個(gè)刻有幾個(gè)同心圓環(huán)的場(chǎng)玻璃圓盤(pán)放在視場(chǎng)光闌處，調(diào)節(jié)燈聚光器使燈絲的像和燈絲的反射像聚焦在場(chǎng)玻璃圓盤(pán)上，并且通過(guò)燈室上的燈來(lái)調(diào)節(jié)螺旋和反光鏡調(diào)節(jié)螺旋，把燈絲的像和燈絲的反射像*移到圓盤(pán)的*并處于并排相對(duì)的位置，這時(shí)燈就處于均勻的照明狀態(tài)。

    尼康顯微鏡鏡筒的調(diào)節(jié)。首先把有標(biāo)本的載玻片用片夾固定在載物臺(tái)上，選擇一個(gè)中等放大倍數(shù)的物鏡用來(lái)進(jìn)行聚焦。把集光器上升到zui高位置，并打開(kāi)孔徑光闌和視場(chǎng)光闌。然后用推或拉的方法調(diào)節(jié)兩個(gè)目鏡之間的距離。在兩個(gè)目鏡上同時(shí)用兩只眼睛觀察使得兩個(gè)圓形的視場(chǎng)正好*重合，這時(shí)雙目鏡筒刻度盤(pán)上所讀出的數(shù)字，就是觀察者兩眼瞳孔之間的距離（以毫米為單位）。這個(gè)距離對(duì)于同一個(gè)觀察者來(lái)說(shuō)是固定不變的，因此記下這個(gè)讀數(shù)，在再次觀察時(shí)可以直接從刻度盤(pán)上調(diào)節(jié)到這個(gè)距離。對(duì)于有缺陷的視力還可以通過(guò)調(diào)節(jié)目鏡螺旋進(jìn)行矯正，矯正的方法是:先用右眼通過(guò)左邊的目鏡觀察標(biāo)本并用細(xì)調(diào)旋鈕聚焦;然后用左眼通過(guò)左邊的目鏡觀察已聚焦的同一標(biāo)本，如果觀察者視力正常，用左眼所看到的物像仍然是清晰的;如果觀察者視力有缺陷，這個(gè)物像就不清晰，這時(shí)應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng)左邊目鏡上的聚焦螺旋（注意決不能轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)旋鈕）再次聚焦標(biāo)本使之*清晰為止，此后在尼康顯微鏡的使用過(guò)程中再不能隨意轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡聚焦螺旋。

    集光器的調(diào)中和視場(chǎng)光闌的調(diào)節(jié)。這種調(diào)節(jié)是根據(jù)柯勒照明原理進(jìn)行的，因此一般被稱(chēng)為柯勒照明法。它對(duì)于尼康顯微鏡的使用是非常重要的，其步驟是:

（ 1）關(guān)閉視場(chǎng)光闌，這時(shí)在視場(chǎng)中可以看到一個(gè)邊緣模糊的圓形或多邊形亮斑   

（2）旋轉(zhuǎn)集光器垂直調(diào)節(jié)旋鈕，逐漸降低集光器直到圓形或多邊形亮斑（實(shí)際上是視場(chǎng)光闌的像）的邊緣*清晰。

（ 3 ）調(diào)節(jié)集光器上的兩個(gè)調(diào)中螺旋，把視場(chǎng)光闌的像調(diào)到視場(chǎng)的*。

（ 4）逐漸打開(kāi)視場(chǎng)光闌，使得視場(chǎng)光闌像的邊緣剛好消失在視場(chǎng)之外。

    在這里順便談一下視場(chǎng)光閡和孔徑光閡的功能及其調(diào)節(jié)的依據(jù)。

    視場(chǎng)光闌的作用是控制標(biāo)本照明區(qū)域的大小，阻止對(duì)于像的形成所不需要的光線進(jìn)入標(biāo)本，從而保護(hù)標(biāo)本以免過(guò)熱受損。因此視場(chǎng)光闌的大小以開(kāi)到正好使被觀察的物場(chǎng)*照明為宜，當(dāng)更換不同放大倍數(shù)的物鏡時(shí)，由于物場(chǎng)大小發(fā)生變化，就要重新調(diào)節(jié)視場(chǎng)光闌，但并不需要重新調(diào)中集光器。

    孔徑光闌是決定尼康顯微鏡成像的分辨力和反差的重要光學(xué)部件之一?？讖焦怅@的大小是根據(jù)所用物鏡的孔徑來(lái)決定的，當(dāng)集光器的孔徑稍低于物鏡的孔徑，即物鏡孔徑的70%被光線充滿(mǎn)時(shí)，能夠達(dá)到的光學(xué)效果。因此當(dāng)更換不同數(shù)值孔徑的物鏡時(shí)，就要根據(jù)物鏡數(shù)值孔徑的70%計(jì)算值，及時(shí)地調(diào)節(jié)集光器的孔徑光闌。還必須注意的是:像的亮度決不能用孔徑光闌來(lái)調(diào)節(jié)，而只能用調(diào)節(jié)變壓器或使用中密度濾光片來(lái)調(diào)節(jié)。